目的:
此前实验发现,部分基因表型可直接影响A549细胞糖原相关蛋白。对这些基因进行基因敲除和过表达处理,通过LiCellMo活细胞代谢分析仪连续监测基因编辑后的细胞糖酵解水平的变化,筛选出可以对糖酵解通路产生影响的基因。
结果:
图1 低糖情况下A549基因敲除处理的葡萄糖浓度-时间曲线。
通过活细胞代谢分析仪LiCellMo从A549细胞的7种影响糖原相关蛋白的基因里筛选出了两种可影响糖酵解通路的基因。
且基因6对糖酵解通路的调节与培养基中葡萄糖浓度有关,低糖情况下基因敲除促进糖酵解水平,基因过表达抑制糖酵解水平。高糖情况下基因敲除抑制糖酵解水平。
基因2则在低糖情况下无论基因敲除还是基因过表达均抑制A549细胞的糖酵解水平,并且对糖酵解通路的调节与培养基中葡萄糖浓度无关。
评价:
LiCellMo的高通量基因筛选明确了后续的研究计划,围绕筛选出的两个基因展开下游的机理研究。
因此活细胞代谢分析仪LiCellMo可以为科学假设提供直接的数据支持,对下一步的科研方向具有重要的指导意义。
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